祭祀高禖
在上巳节活动中，最主要的活动是祭祀高禖，即管理婚姻和生育之神。高禖，又称郊禖，因供于郊外而得名。禖同媒，禖又来自腜。最初的高禖，属女性，而且是成年女性，具有孕育状。事实上，远古时期一些裸体的妇女像有着非常发达的大腿和胸部，还有一个向前突出的肚子，这是生殖的象征。在汉代画像石中就有高禖神形象，还与婴儿连在一起。辽宁地区红山文化遗址的女神陶像，就是生育之神。后来高禖有了很大的变化，如河南淮阳人祖庙供奉的伏羲，就是父权制下的高禖神。同时还出现了性具崇拜，先女阴后男根崇拜。起初上巳节是一个巫教活动，通过祭高禖、祓禊和会男女等活动，除灾避邪，祈求生育。从这种意义上说，上巳节又是一个求偶节、求育节。汉代以后，上巳节虽然仍旧是全民求子的宗教节日，并且传说农历三月三是西王母的生日，但已经是贵族炫耀财富和游春娱乐的盛会。
曲水流觞
在上巳节中还有临水浮卵、水上浮枣和曲水流觞三种活动。在上述三种水上活动中，以临水浮卵最为古老，它是将煮熟的鸡蛋放在河水中，任其浮移，谁拾到谁食之。水上浮枣和曲水流觞则是由临水浮卵演变来的。不过，这是一种比较文明的孕育巫术。曲水流觞和临水饮宴则是这种巫术的演变，成为文人雅士的娱乐活动。
祓禊沐浴
上巳节还有祓禊、修禊或沐浴活动。沐浴是为了去灾。史前人类认为生育是由图腾入居妇女体内的结果。进入父权制时代之后，人们才明白了夫妻交媾是生育的原因。但是无论是图腾感生的观念，还是夫妻交媾导致生育的认识，都承认妇女是生育的体现者，子女是由母亲孕育的。然而，并不是每个妇女都能正常生育的，由于疾病原因，往往使某些妇女不孕育。当时人们认为妇女不育是鬼神作祟，就利用上巳节的沐浴治疗不育症。这样久而久之，相沿成习，把沐浴变成上巳节的重要内容。云南初春流传的洗脚大会，就是古代祓禊的遗风。修禊，源于周代的一种古老习俗，即农历三月上旬“巳日”这一天，人们相约到水边沐浴、洗濯，借以除灾去邪，古俗称之为：“祓禊”。后文人饮酒赋诗的集会，也称为修禊。春日踏青有“春禊”，秋日秋高气爽，文人怎能辜负这大好时光，自然会有“秋禊”，时间一般是在农历七月十四。历史上最为有名的修禊当数兰亭修禊和红桥修禊。
会男女
在上巳节中有一种奇特的风俗，即“会男女”。这种节日中的野合，由来已久，本来自氏族时期的季节性婚配——野合群婚，后来也有残存，如广西左江崖画、成都汉墓画像砖上都有男女野合图。后来的记载也多见此俗。在中国少数民族地区有不少会男女的风俗，如黎族的三月三、苗族的爬坡、布依族的抛绣球等等。踏青也是此类遗风。江苏武进地区在初三游南山，民谣曰：“三月三，穿件单布衫；大蒜炒马兰，吃了游南山。。”
蟠桃会
道教兴起后，认为农历三月三为西王母蟠桃会之日。拜西王母在中国普遍盛行，但其他地方也有祭其他神求子的风俗，如扬州拜三茅真君，又称瞎子赛会。温州则在农历三月三供无常鬼，祈求健康，多生贵子。厦门有石狮会，成都有抛童子会。在抛童子会上，谁抢到童子，谁就能生子，故抢到童子的人被视为英雄。山东齐河不育妇女，在农历三月三要去娘娘庙烧香叩拜，主持赐给一根红线，求育者用红线拴一个泥娃娃，象征娘娘神赐子，生子后把泥娃娃放在墙洞内，每年的农历三月三都要给娘娘神烧香上供。在杨柳青年画中有一幅“大娃娃”年画，说明京津地区也流行拴娃娃风俗。当前农历三月三已经逐渐被淘汰了，但各地还有类似风俗，如安徽繁昌的接三姑娘、浙江丽水的龙子庙会、吉林永吉的龙王祭、浙江海宁的双忠庙会等等。 上巳节虽然主要是祈求人类繁衍，但是古代信仰认为人的繁衍也能促进农作物的繁殖。民间流传的麦生日，就认为麦与人一样有一种生育能力。农历三月三在吉林有 许多节日活动：一种是瞎子会，即盲人集会，选会首，共聚餐，实行自我保护；另一种是大神节，在此举行萨满出师会，并抬神出巡，此后作法时就可独立跳神了。有的当天还要祭仓神，成为祭犁日，从此开始春耕活动。正因为如此，上巳节之后，人们就开始了农忙。 古代有些地方，在上巳节期间还进行一种弋射活动，即利用一种带丝线的箭射击野雁，射中后即索丝而取雁。这种雁与其说是猎物，莫如说是送礼的最好赠品。南方劳动妇女则开始育蚕，采桑喂蚕。