弓形虫检查的方法有多种,包括病原学检查、PCR检测特异性核酸、血清学诊断以及辅助检查等,具体的弓形虫检查方法有:
1、病原学检查:将可疑病畜或死亡动物的组织或体液,做涂片、压片或切片,甲醇固定后,作瑞氏或姬氏染色镜检可找到弓形虫滋养体或包囊。
2、用PCR方法检测特异性核酸。聚合酶链反应(PCR)是一种很普及的技术,广泛应用于临床诊断和分子生物学研究。在临床实验室中,PCR对感染性疾病的检测是至关重要的。
3、血清学诊断:间接荧光抗体试验、间接血凝抑制试验、酶联免疫吸附试验和补体结合试验检测特异性IgM、IgG、IgA抗体或血清循环抗原。
4、辅助检查:
(1)亚甲蓝染色试验:在弓形虫感染早期(10-14天)即开始阳性,第3-5周效价可达高峰,可维持数月至数年。低效介一般可代表慢性或过去的感染。从母体得来的抗体,在生后3-6个月内消失。因此小儿满4个月后,可重复染色测定抗体,如效价仍维持高度,就可证明由于感染。
(2)间接免疫荧光试验:所测抗体是抗弓形虫igg(免疫球蛋白G),其出现反应及持续时间与亚甲蓝染色试验相仿。
(3)igm-免疫荧光试验:是改良的间接免疫荧光试验,弓形虫感染5-6天即出现阳性结果,可持续3-6月,适于早期诊断。igm即免疫球蛋白M,由于igm的分子量大,母亲的igm一般不能通过胎盘传给胎儿,如新生儿血清中含有抗弓形虫igm,则可考虑先天性弓形虫病的诊断。
(4)直接凝集反应:主要用于测抗弓形虫igm,以1:16凝集作为阳性,弓形虫感染后5-6天则能测得阳性。
(5)酶联免疫试验和可溶性抗原-荧肖抗体技术:操作简便、快速,前者并可适用于大规模普查,其敏感性和特异性均较满意,后者只要一次稀释就能没出抗体水平,其敏感性与免疫荧光反应相仿。
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