新生儿败血症的症状缺乏特异性，早期诊断有一定困难。凡遇母亲孕期有感染史、出生时有消毒不严、产程延长、胎膜早破及羊水污染，生后有皮肤、粘膜损伤或感染（如脐炎、脓疱疹）的新生儿，结合临床表现，应考虑本病的可能。
1、病史
凡有以下危险因素均要考虑细菌感染的可能：①羊膜早破大于12～24h;②母孕后期有发热和绒毛膜炎病史;③出生时Apgar评分低并有抢救史;④早产、双胎。
院内感染易发生于下列情况：①新生儿监护病区（NICU）治疗的患儿;②有入侵式治疗的患儿如气管插管、脐静脉插管等;③住院天数长;④接受手术治疗的患儿;⑤病房拥挤;⑥长期应用广谱抗生素治疗等。
2、临床表现
新生儿常表现为非特异性的症状。
（1）呼吸窘迫为最常见，在败血症婴儿中占90%，严重程度可有不同：如轻微的呼吸急促，鼻掮呼吸三凹征、对氧的需要增加，呼吸暂停、呼吸困难、甚至出现呼吸衰竭需要人工通气。
（2）心率增快和周围循环灌注差，青紫。
（3）低血压。
（4）酸中毒（代谢性），低血糖或高血糖。
（5）体温不稳定：10%-30%的新生儿可有发热和体温不升。
（6）胃肠道症状：包括呕吐、腹泻、腹胀、纳差。
（7）活动减弱或嗜睡、烦躁不安、呻吟。
（8）抽痉。
（9）瘀斑或瘀点。
（10）其他如黄疸、肝脾肿大等。
3、实验室检查
（1）外周血白细胞计数和分类：血白细胞计数《5 109=“” l=“”》0.2提示有细菌感染。
（2）血小板计数：血小板计数《100×109/L提示新生儿败血症的可能。
（3）急相蛋白：①C-反应蛋白》15μg/ml提示有细菌感染，②ESR》15mm/h.
（4）血培养检查：血培养阳性可确立病因诊断，疑有感染的患儿均需在入院后用抗菌素前取周围血做培养，并应严格遵守无菌操作，防止污染。如患儿用过作用于细胞壁的抗生素，如青霉素、头孢菌素，可用高渗培养基作L型细菌培养，怀疑有厌氧菌感染时，可作厌氧菌培养。
（5）其他部位培养：脐部、尿液、大便或其他局部感染灶的培养。
（6）放射学的检查：胸部X线检查在有呼吸系统症状的患儿均应进行。
（7）病原菌抗原检测：如对流免疫电泳、乳胶凝集试验，血凝抑制试验等方法。